home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ Shareware Overload Trio 2 / Shareware Overload Trio Volume 2 (Chestnut CD-ROM).ISO / dir26 / med9408c.zip / M9480497.TXT < prev    next >
Text File  |  1994-08-20  |  4KB  |  53 lines
  1.        Document 0497
  2.  DOCN  M9480497
  3.  TI    Selected mutations of the duck hepatitis B virus P gene RNase H domain
  4.        affect both RNA packaging and priming of minus-strand DNA synthesis.
  5.  DT    9410
  6.  AU    Chen Y; Robinson WS; Marion PL; Department of Medicine, Stanford
  7.        University School of Medicine,; California 94305.
  8.  SO    J Virol. 1994 Aug;68(8):5232-8. Unique Identifier : AIDSLINE
  9.        MED/94309190
  10.  AB    The genome of all hepadnaviruses has an open reading frame called the P
  11.        gene, which encodes a polypeptide of 90 to 97 kDa. The product or
  12.        products of this P gene are involved in multiple functions of the viral
  13.        life cycle. These functions include a priming activity which initiates
  14.        minus-strand DNA synthesis, a polymerase activity which synthesizes DNA
  15.        by using either RNA or DNA templates (reverse transcriptase), a nuclease
  16.        activity which degrades the RNA strand of RNA-DNA hybrids (RNase H), and
  17.        involvement in packaging the RNA pregenome into nucleocapsids. In a
  18.        previous study, we found that a single point mutation at position 711 in
  19.        the duck hepatitis B virus (DHBV) P gene product RNase H domain
  20.        prevented viral RNA packaging. In the present experiments, we have
  21.        mutated additional conserved amino acids in the DHBV RNase H domain and
  22.        examined the ability of viral genomes containing these mutations to
  23.        package RNA and replicate viral DNA. Charged and sulfur group amino
  24.        acids adjacent to Cys-711 were mutated. None of these mutants was
  25.        defective in either RNA packaging or viral replication. We also tested a
  26.        number of mutations on the basis of common elements in the crystal
  27.        structures of Escherichia coli and human immunodeficiency virus reverse
  28.        transcriptase RNase H enzymes and on the basis of the similarities of
  29.        their amino acid sequences to those of the RNase H domains of DHBV and
  30.        HBV. Our results revealed that the entire beta 4 strand and amino acids
  31.        Leu-712, Leu-697, and Val-719 in the putative hydrophobic cores of the
  32.        beta 4, alpha A, and alpha B regions, respectively, are involved in
  33.        pregenomic RNA encapsidation. This suggests that the basic structure of
  34.        the RNase H domain in the DHBV P gene product is required for viral RNA
  35.        packaging. We used the in vitro DHBV minus-strand DNA priming system
  36.        developed by Wang and Seeger (G.-H. Wang and C. Seeger, Cell 71:663-670,
  37.        1992) to test the effect of RNase H packaging mutations on P gene
  38.        product enzymatic activity. While all packaging-defective mutants tested
  39.        maintained DNA priming activity, levels were decreased 5- to 20-fold
  40.        compared with that of the wild-type genome. This observation suggests
  41.        that the hepadnavirus RNase H domain plays a role in optimizing priming
  42.        of minus-strand DNA synthesis.
  43.  DE    Amino Acid Sequence  DNA Primers  DNA, Viral/*BIOSYNTHESIS
  44.        Electrochemistry  Hepatitis B Virus, Duck/ENZYMOLOGY/*GENETICS
  45.        Molecular Sequence Data  Point Mutation  Ribonuclease H, Calf
  46.        Thymus/*GENETICS/METABOLISM  RNA Processing, Post-Transcriptional  RNA,
  47.        Viral/*METABOLISM  Support, U.S. Gov't, P.H.S.  Viral
  48.        Proteins/*GENETICS/METABOLISM  Virus Replication  JOURNAL ARTICLE
  49.  
  50.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  51.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  52.  
  53.